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发布时间：2022-06-15 19:41:00 作者：同金化工
单个TKgst突变体DI、LF、FI和LI 在大肠 BL菌株中表达并进行纯化。将TKgst突变体与型TKgst对(S)-羟基酮-的活性进行了比较（Chart ）。(S)-,,-trihydroxybutan--one (l-erythrulose，) 是型TK的非磷酸化底物之一，被选为对照。型和突变体对表现出的活性，除了DI，它是被脂肪链取代的极性残基。非极性残基Ile代替Asp显着降低酶的活性，可能是由于缺乏与的C的羟基的相互作用。脂肪链对其他非极性残基的突变对活性没有影响。
与HLH（G或A）L相比，这些突变体随着时间的推移（在°C下）具有更高的热稳定性。HLHSLI活性位点的分子模型表明，Ser在位的存在有利于与Asp 的相互作用，这对于稳定链A或B的Asp 和链B或A的Arg 之间的桥似乎很重要。产物的对映体过量(ee ) 表明存在一种主要的对映体，表明TKgst突变体对C有高度的立体选择性控制。
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